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UV1901PC紫外分光光度計(jì)法測(cè)定熒光增白劑的熒光強(qiáng)度（二苯乙烯三嗪）

熒光增白劑的主要質(zhì)量指標(biāo)熒光強(qiáng)度（或稱白度）是一種相對(duì)的的純度指標(biāo)，它是指試樣的活性成分與同一結(jié)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)樣品活性成份的相對(duì)比值。熒光強(qiáng)度的測(cè)定方法有染色法、紫外法和熒光法等。目前我國(guó)生產(chǎn)或使用單位大多采用染色法，這是一種間接的測(cè)定方法，即使一系列選定濃度的標(biāo)樣與定量的試樣在特定的條件下染至棉紗、棉布或紙張上，然后對(duì)比被染物（目測(cè)或用白度計(jì)測(cè)量）而確定試樣的熒光強(qiáng)度。

UV1901PC紫外分光光度計(jì)法測(cè)定二笨乙烯三嗪型熒光增白劑的熒光強(qiáng)度的原理

二笨乙烯三嗪型熒光增白劑的分子可以有順式和反式兩種異構(gòu)體，而該類熒光增白劑在光照后能反射熒光，是由于處于同一平面的反式異構(gòu)體中，二笨乙烯共軛體系的π電子云重疊的結(jié)果。順式異構(gòu)體分子中，由于相鄰基團(tuán)的空間的空間位阻，其分子不得處于同一平面，從而二笨乙烯共軛體系被破壞，故不能反射熒光，因此，二笨乙烯三嗪型熒光增白劑的活性成份就是它的反式異構(gòu)體。

該化合物的紫外（吸收）光譜在270豪微米和349豪微米呈現(xiàn)明顯的吸收，其中349豪微米的吸收處相應(yīng)于反式二笨乙烯分子的共軛體系，而270豪微米的吸收是苯胺基團(tuán)的吸收峰，因此，順式異構(gòu)體的紫外光譜不呈現(xiàn)349豪微米的吸收，所以，當(dāng)熒光增白劑的熒光強(qiáng)度降低即反式異構(gòu)體的含量減少時(shí)，其紫外光譜的349毫微米吸收峰強(qiáng)度就要下降。不同強(qiáng)度的試樣同一濃度水溶液的紫外光譜，顯然，熒光強(qiáng)度越高，349毫微米的吸光度越大。

  將10-60毫克/升試樣水溶液的紫外光譜中349毫微米吸光度對(duì)濃度作圖得一通過原點(diǎn)的直線，符合比爾定律。

以349毫微米的比吸收系數(shù)作為定量分析的依據(jù)。從試樣349毫微米的比吸收系數(shù)K與標(biāo)樣在同一波長(zhǎng)的比吸收系數(shù)K，即可求出試樣的熒光強(qiáng)度S。

如果先從K 計(jì)算出單位熒光強(qiáng)度的比吸收系數(shù)K

則將K與K相比，即可直接讀出試樣的熒光強(qiáng)度。

實(shí)驗(yàn)儀器：

UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)或UV1902PC紫外分光光度計(jì)二選一即可

試劑 熒光增白劑

標(biāo)樣：符合標(biāo)準(zhǔn)HG2-382-66熒光強(qiáng)度130

操作步驟：稱取一定量的樣品，在容量瓶中配成1000毫升水溶液，再用移液管吸移10毫升該溶液至1000毫升水溶液，再用移液管吸移100毫升容量瓶中，加水至刻度。配得的溶液應(yīng)避光放置，在5分鐘內(nèi)于349毫微米處測(cè)量溶液的吸光度E，然后從濃度C（毫克/升）和吸收池厚度L（厘米），計(jì)算出比吸收系數(shù)K（升/毫克.厘米），K=E/CL.

  光照時(shí)間對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響：二笨乙烯三嗪型熒光增白劑的反式異構(gòu)體，在紫外線照射下，分子中的苯環(huán)會(huì)發(fā)生旋轉(zhuǎn)，易購(gòu)成順式結(jié)構(gòu)，熒光增白劑溶液的濃度越稀異構(gòu)化越易發(fā)生。

因此，當(dāng)熒光增白劑試樣的溶液暴露在日光下時(shí)，它的熒光強(qiáng)度隨著照射時(shí)間的增加而下降，

當(dāng)2條曲線是同一個(gè)熒光增白劑溶液在剛配制好以及在一般光線下防置了15分鐘后的兩個(gè)紫外光譜，可見15分鐘后，349毫微米的吸光度明顯下降了。

不同濃度的熒光增白劑試樣溶液在一般光線下放置及避光放置后349毫微米吸光度隨時(shí)間變化的情況。說明了避光放置時(shí)，在20分鐘內(nèi)吸光度幾乎不變。在一般光線下放置5分鐘后，吸光度即下降2.5-1.3%。試樣溶度較高時(shí)，變化幅度較小。

溫度對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響：將同一濃度不同溫度的試樣溶液進(jìn)行紫外測(cè)量，溫度的影響為：溫度升高1度，吸光度（349毫微米）遞增（0.46±0.06%）

樣品重復(fù)測(cè)定實(shí)驗(yàn)：

取樣品按操作步驟重復(fù)測(cè)定6次，從測(cè)得的比吸收系數(shù)求出樣品的熒光強(qiáng)度S

計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)偏差及變異系數(shù)，結(jié)果表明，本方法測(cè)定樣品重現(xiàn)性，度較好。

結(jié)果討論

光照時(shí)間和溫度對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響較大，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說明，如按操作步驟要求，試樣溶液配制好以后避光放置，并在5分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)量，可消除光照的影響，而試樣溶液的濃度稍大一些更好，根據(jù)使用紫外分光光度計(jì)時(shí)所要求的吸光度范圍，以25毫克/升左右為宜。在實(shí)踐中，先測(cè)定幾個(gè)溫度的標(biāo)樣比吸收系數(shù)K，然后根據(jù)試樣溶液的溫度，選擇相近溫度的K進(jìn)行計(jì)算。

紫外可見分光光度計(jì)法不耗用棉布，直接測(cè)量試樣溶液，測(cè)定一個(gè)樣品僅需10分鐘，而染色法除需要耗用棉布（約0.5米/噸）外，分析一次樣品需3-4小時(shí)。因此，用紫外分光光度計(jì)法測(cè)定熒光增白劑的熒光強(qiáng)度，用以分析工業(yè)產(chǎn)品，控制生產(chǎn)，確是一個(gè)快速、簡(jiǎn)便的方法，度較高，值得推廣。