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                              紫外可見分光光度計法測鉛

紫外可見分光光度計對于分析人員來說是zui有用的分析工具之一，幾乎每一個分析實驗室都離不開紫外可見分光光度計。紫外可見分光光度法是利用物質分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進行分析的一種儀器分析方法。這種分子吸收光譜產生于價電子和分子軌道上的電子在電子能級間的躍遷，它廣泛用于無機和有機物質的定性和定量分析。朗伯一比耳定律( Lambert-Beer)是光吸收的基本定律，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據和基礎。當入射光波長一定時，溶液的吸光度A是吸光物質的濃度C及吸收介質厚度l（吸收光程）的函數。其常用表達式為：A=∈×l×C （式中，∈為系數）紫外可見分光光度計廣泛應用于冶金、機械、化工、醫(yī)療衛(wèi)生、臨床檢驗、生物化學、環(huán)境保護、食品、材料科學等領域的生產、教學和科研工作中，特別適合對各種物質進行定量及定性分析。

鉛是一種具有蓄積性的元素，鉛污染直接來源于飲用水、蔬菜、糧食、水果、肉類與畜產品，間接來源于食品的生產、包裝、運輸等過程。鉛危害主要表現為以下幾個方面：影響腦、腎、神經系統(tǒng)和血紅細胞等的功能；影響嬰幼兒的生長和智力發(fā)育，損傷認知功能、神經行為和學習記憶能力等，嚴重者造成癡呆。因此，對鉛的有效檢測一直備受關注。本文采用紫外可見分光光度計法測定微量鉛含量，通過正交實驗研究了緩沖溶液PH值、顯色劑二甲酚橙（XO）用量、表面活性劑氯代十六烷基吡啶（CPC）用量對鉛含量測定的影響。

主要實驗儀器：

UV1902型雙光束紫可見分光光度計（上海奧析科學儀器有限公司）

以二溴羥基苯基卟啉為顯色劑，配合物zui大吸收波長為479nm，在*實驗條件下繪制標準曲線，在0.06~1.00mg/ml范圍內呈線性相關，線性回歸方程為y=0.894x-0.022，相關系數為0.9994，摩爾吸光系數ε=2.8×105L·mol-1·cm-1，方法檢出限為0.02ug/ml。

雙光束雙波長分光光度法是在傳統(tǒng)分光光度法的基礎上發(fā)展起來的，它的理論基礎是差吸光度和等吸收波長。它與傳統(tǒng)分光光度法的不同之處，在于它采用了兩個不同的波長即測量波長和參比波長同時測定一個樣品溶液，以克服單波長測定的缺點，提高了測定結果的精密度和準確度。

UV1902型雙光束紫可見分光光度計（上海奧析科學儀器有限公司）

  UV1901(PC)/UV1902(PC)是一臺雙光束掃描型紫外可見分光光度計。它具有較寬的光譜范圍和優(yōu)良的品質。由于儀器內藏式微處理機系統(tǒng)的強大作用，加上優(yōu)良的光學、電路系統(tǒng)和合理的機械結構，并采用大屏幕液晶顯示，將為各行業(yè)實驗室的分析測試工作提供十分有效而直觀的手段。

    UV1901(PC)/UV1902(PC)紫外/可見分光光度計采用中文人機對話的操作方式，簡便易學。大屏幕液晶顯示屏上的菜單對每一個對應的操作步驟進行選擇和認可，即能完成你所需的功能。該儀器燈源的更換一改過去國產儀器繁瑣的方法，整個燈源的更換操作，用戶只需旋動幾個螺絲即可完成，無需進行繁瑣的對光調整即能保證燈源處于*位置。

    儀器的軟件程序設計具有自動保護功能，確保儀器在萬一操作失誤時仍能及時恢復正常工作。

    作為一種的實用型紫外/可見分光光度計，UV1901(PC)/UV1902(PC)紫外/可見分光光度計快速簡捷的分析方法廣泛應用于有機、無機、石油、制藥、環(huán)境、生物化學、醫(yī)學、食品等部門，是常規(guī)質量控制（QC）和質量分析（QA）zui主要的儀器之一。

1.3.1  自動控制功能

1） 開機儀器內部系統(tǒng)工作狀態(tài)自檢及自動校正波長

2） 波長變換自動定位

3） 濾色片自動切換

4） 光源自動切換

5） 自動選擇光源的*切換點

6） 圖譜、數據顯示打印

7） 顯示各種出錯信息

1.3.2  分析測試及信息處理功能

1） 光譜掃描

2） 單波長定量分析（含多階回歸濃度參數測定）

3） 二波長、三波長定量分析（含多階回歸濃度參數測定）

4） 多階導數測定

5） 多波長測定

6） 化學動力學測量

7） 曲線的組合及運算，曲線多階微分平滑，圖譜縮放，曲線保存調用。

8） 峰值標定、搜索、打印輸出

雙波長多波長測量菜單

在主菜單中選中該項后,按[ENTER]鍵即可進入此功能塊。

操作需知

1） 按[←][↑][→][↓]鍵到達你所需設定的行,對每一修正行,如輸入數值有錯,請按[CE]鍵清除后,重新輸入正確數值即可。

如輸入數據不在可選擇范圍內,屏幕提示:輸入錯誤  此時輸入正確數值即可.

2） 修改完修正行后,需按[ENTER]鍵,加以確定. 

1） 測量模式：分為兩種，即透射比（T%）、吸光度（ABS）

本模式沒有[E]測量方式。（本例為透射比）

2） 測量波長數：對測量波長個數的設定，程序設定為（1～6）個點。

設定完成后，屏幕提示：請輸入波長····

此時請依次輸入波長的具體值。

所有波長值輸入完成后（本例為440nm、546nm、635nm三點），用一對配套石英比色皿倒入參比樣品，分別放入參比光路和樣品光路（本例參比為空氣），然后按下[F1]鍵即[多點校正]。

屏幕提示：   多點校正中·····

儀器自動依次對每個波長點0%(暗電流)及100%(滿度)進行調整,自調結束屏幕提示消失后.取出樣品光路中的比色皿,重新倒入待測樣品并放回樣品光路(本例待測樣品為10%濾光片)，按[START/STOP]鍵,此時儀器自動依次測出樣品在每個波長點的測量值。

重復按[START/STOP]鍵可以進行多個樣品的測量.

每個樣品測量完成后,按[F4]鍵對所測得數據進行打印輸出.

由于鉛離子與XO形成金屬配合物后會使其紫外吸收峰紅移，且吸收強度有較大的增強，從而具有很好的顯色效果。

影響鉛含量測定的主要因素是緩沖溶液PH值、XO用量、CPC用量。因此，本實驗選擇緩沖溶液PH值、XO用量、CPC用量3個因素進行3因素5水平的正交實驗，優(yōu)化測定條件。