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操作步驟
1.1 打開 721 型分光光度計(jì)電源開關(guān)和比色皿室的箱蓋，使光電管在無光照情況下預(yù)熱 20 min。
1.2 旋轉(zhuǎn)波長調(diào)節(jié)器，選擇 450 nm 為測定所需的單色光波長。
1.3 選擇適當(dāng)?shù)撵`敏度，一般先將靈敏度旋鈕旋至低檔位。
1.4 調(diào) 0%：打開比色皿室的箱蓋（關(guān)閉光門），用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)旋鈕使電表指針在通光度（T 值）
為 0%處。1.5 調(diào) 100%：在比色皿中加入豬精液稀釋劑溶液 4 mL，拉動(dòng)拉桿使其置于光路中，蓋上比色皿室箱蓋（打開光門），調(diào)節(jié)光量調(diào)節(jié)旋鈕，使電表指針在 T 值為 100%處。

1.6 反復(fù)調(diào)節(jié)旋鈕，直到關(guān)閉光門和打開光門時(shí)指針分別指在 T 值為 0%和 100%處為止。

如果 T 值不能調(diào)節(jié)到 100%，就增大靈敏度，重新調(diào) 0%、100%。

1.7 待測溶液的配制：取比色皿一支（以容量為4 mL 比色皿為例），分別加入 3.6 mL 豬精液稀釋劑溶液，0.4 mL 豬原精液混勻，用擦鏡紙擦干比色皿透光面，使其光亮，無氣泡。1.8 將待測溶液置于比色皿并放入比色皿室中，蓋上箱蓋，拉動(dòng)拉桿將待測溶液置于光路中，此時(shí)從指針的位置讀得待測溶液的 T 值或吸光率（A 值）。T 值或吸光率（A 值）根據(jù)對(duì)照表讀取精液密度。

2 操作技巧
2.1 使用比色皿時(shí)，只能拿毛玻璃的兩面，并且必須用擦鏡紙擦干透光面，以保護(hù)透光面不受損壞或產(chǎn)生斑痕。用比色皿裝液前必須用所裝溶液沖洗 3 次，避免改變?nèi)芤旱臐舛取?br />2.2 生豬精液取樣時(shí)應(yīng)取精液瓶中間的液樣。
2.3 生豬精液長期放置會(huì)下沉到容器底部，因此，取樣時(shí)應(yīng)搖勻，測量時(shí)速度要快，讀數(shù)要準(zhǔn)。

3 計(jì)算方法

利用分光光度計(jì)測出 T 值后，根據(jù)對(duì)照表讀取精液密度（ρ），用于計(jì)算稀釋液的加入量和確定分裝瓶數(shù)，計(jì)算公式如下：
Y=ρ×V×m×（1-n）÷35（億/瓶）

V1=Y×80（mL）

V2=V1-V0

注：ρ 為精液密度，V 為豬精液體積，m 為精子活力，n 為精子畸形率，Y 為瓶數(shù)，V0 為采精量，V1 為豬精液稀釋后的體積，V2 為加入稀釋液的體積。按照國家標(biāo)準(zhǔn) GB/T 25172-2010，精液產(chǎn)品中總精液數(shù)為 30~35 億個(gè)/瓶，每劑 80 mL。實(shí)際生產(chǎn)過程中，精子畸形率通過普通顯微鏡難以檢測，因此，精子畸形率=0%，稀釋后精子活力與之前保持不變。